欢迎来到 阿仪网

免费注册

首页 | 产品 | 求购 | 资讯 | 专题 | 找厂商 | 打听 | 人才 | 品牌 | 资料 | 技术文献 | 展会 | 耗材 | 配件 | 新品 | 促销 | 书籍 | 招标 | 优质仪器
广告

您的位置: 首页 >技术文献 >技术交流 >检测细胞凋亡的三种常用方法,您知道几种?

检测细胞凋亡的三种常用方法,您知道几种?

提供者:上海恒远生物科技有限公司   发布时间:2019/10/25  阅读次数:77次   进入该公司展台

     人体内的细胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡则是病理性的,有关细胞死亡过程的研究,已成为生物学、医学研究的一个热点,身为一位科研工作者,对细胞凋亡的几种检测方法都应该有所了解!今天上海恒远为大家整理了相关内容,希望能够帮到大家。
 
    一、形态学观察方法
 
    1.HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。
 
    2.丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:医学教/育网搜集整理活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。
 
    3.台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助。
 
    4.透射电镜观察:可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边集,常呈新月形,核膜皱褶,胞质紧实,细胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。
 
 
    二、DNA凝胶电泳
 
    1.检测原理
 
    细胞发生凋亡或坏死,其细胞DNA均发生断裂,细胞内小分子量DNA的片断增加,高分子DNA减少,胞质内出现DNA的片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有规律的发生在核小体之间,出现180-200bpDNA的片断,而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱片断,利用此特征可以确定群体细胞的死亡,并可与坏死细胞区别。
 
    2.结果判断
 
    正常活细胞DNA 电泳出现阶梯状(LADDER)条带;坏死细胞DNA电泳类似血抹片时的连续性条带。
 
    三、酶联免疫吸附法(ELISA)核小体测定
 
    凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。核小体由组蛋白及其伴随的DNA的片断组成,可由ELISA法检测。
 
    1.检测步骤
 
    1.1.将凋亡细胞裂解后高速离心,其上清液中含有核小体;
 
    1.2.在微定量板上吸附组蛋白体;
 
    1.3.加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合;
 
    1.4.加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合;
 
    1.5.加酶的底物,测光吸收制。
 
    2、用途
 
    该法敏感性高,可检测5*100/ml凋亡细胞。可用于人、大鼠、小鼠的凋亡检测。该法不需要特殊仪器,适合基层工作,但是不能测定凋亡细胞发生的绝多对量。
 

关键词:ELISA试剂盒  

上一篇:沥青低温延伸仪工作原理 下一篇:酶联免疫检测试剂盒测试原理

优质商品

X射线荧光光谱仪
X射线荧光光谱仪

旗下频道

色谱仪 光谱仪 反应釜 试验箱 试验机 搅拌器 培养箱 离心机 水分测定 气体检测 量热仪 石油仪器 纯水器 比表面仪 温度记录 流量计 万用表 显微镜 粒度仪 测厚仪 硬度计 酸度计 元素分析 生物试剂 电线电缆 天平衡器 传感器 食品检测 压力仪表 电化学 测厚仪 阀门仪表 电力仪表 干燥设备 药物检测
百赢棋牌真人赌博下载